Laboratorio de embriología clínica

El laboratorio de embriología clínica está formado por tres secciones principales:

• Laboratorio de fecundación in vitro (FIV).
• Laboratorio de procesamiento y capacitación de muestras seminales para FIV/ICSI(inyección intracitoplasmática de espermatozoides).
• Laboratorio de crioconservación de embriones.

No existe un consenso en el diseño del laboratorio, aunque tenemos que tener en cuenta que las salas deben estar limpias con un control estricto. El diseño y la gestión del laboratorio tiene un gran impacto en los resultados gestacionales.

En el laboratorio de FIV/ICSI es donde se crean los embriones a partir de los gametos, siempre intentándose optimizar la calidad de los embriones para promover un mayor éxito de implantación.

Funciones

Las tareas realizadas son:

• Punción/recuperación ovocitaria
• Inseminación de los ovocitos.
• Evaluación de la fecundación.
• Cultivo embrionario.
• Selección d embriones para la transferencia y la crioconservación.
• Eclosión asistida.
• Biopsia embrionaria

Capacidad de éxito

Para poder determinar el éxito que tiene una clínica debemos tener en cuenta la medicina basada en la evidencia, puesto que la actividad médica debe fundamentarse sobre bases científicas (racionales, explícitas, juiciosas y actualizadas). Constituyendo un modelo ideal del estudio prospectivo randomizado.

Los parámetros que deberemos tener, de esta forma, en cuenta serán:

• Tasa de embarazo a término: resultado del cociente entre el número total de partos entre el total de transferencias.
• Tasa de RNV (recién nacidos vivos): relación entre el número de RNV y el total de embriones transferidos.
• Tasa de RNV único: obtenida de dividir el número de partos con RNV únicos entre el total de transferencias.

Características a controlar

Como se ha dicho anteriormente la estancia debe tener un ambiente controlado, ello se consigue haciendo una sala blanca o 'clean room'.

En FIV los parámetros más habituales son:

• Temperatura
• Partículas
• Compuestos volátiles orgánicos (VOCs)
• Presión positiva

El diseño específico para el uso de la sala blanca de estos parámetros en el caso del laboratorio de FIV es parecido al de un quirófano, aunque más controlado, sin llegar al nivel de un laboratorio de células madre o de preparación de fármacos.

A continuación se comentarán por separado cada uno de los parámetros enumerados.

Temperatura

El control de la temperatura en el laboratorio es uno de los principales parámetros a controlar. Las dos temperaturas a las que deben prestarse atención son la temperatura ambiente y la temperatura de los incubadores. En los incubadores, los gametos y embriones deben mantenerse a la temperatura corporal, en torno a los 37ºC. El ambiente de la sala debe ser el adecuado para el bienestar de los trabajadores y para que no crezcan microorganismos. Por ello, deben mantenerse entre 21 y 24ºC. Un descenso, por ejemplo, de la temperatura de un incubador, cabina o sistemas de aspiración puede producir la desnaturalización del ovocito.

Se debe mantener una estabilidad de la temperatura para evitar oscilaciones de los aparatos y del ambiente. La mayoría de estos laboratorios aún tienen incubadores de apertura manual. Para valorar los embriones de cada placa que presentan, se debe abrir el incubador y sacar la placa. Esto implica varias aperturas al día, y al final se provoca una desregulación de la temperatura. Esto debe estar muy controlado para que no suponga un problema en el desarrollo de los embriones.

Partículas

En microbiología o medicina es esencial mantener unas condiciones estériles o asépticas, ya que las partículas pueden ser inertes o contaminantes. Para conseguirlo se limita el número de partículas en el ambiente mediante filtración y direccionamiento del aire.

Existe una organización internacional de normalización (ISO) que clasifica en diferentes clases el número de partículas por volumen (m³) que deben existir en diferentes ambientes. El laboratorio de FIV se encuentra en ISO 3, 100 partículas/m³ constituyendo un ambiente libre de partículas infecciosas.

Normalmente se alcanzan ambientes estériles usando filtros HEPA (High Efficiency Particulate Air) en las cabinas de flujo laminar. Para controlar el nivel de patículas de toda la sala estos filtros tienen que instalarse en la climatización y en la salida del laboratorio.

Compuestos volátiles (VOCs)

En una sala blanca la principal prioridad es la eliminación de partículas. No obstante, hay moléculas no filtrables que pueden tener efectos embriotóxicos. Estas moléculas suelen ser compuestos orgánicos volátiles que contienen además elementos como hidrógeno, oxígeno, flúor, cloro, bromo, azufre o nitrógeno. Dichos componentes se encuentran en la combustión de combustibles, disolventes, aromas... Además la mayoría de desodorantes, perfumes y maquillajes tienen compuestos volátiles, por lo que es importante que el personal de laboratorio no los lleve. También pueden encontrarse en productos de limpieza, por lo que todos aquellos que se utilicen en el laboratorio deben ser revisados y aprobados para dicho uso. Otro aspecto importante es evitar tener un laboratorio de FIV cerca de una gasolinera, ya que es fuente de emisión de VOCs.

Se eliminan con unos filtros específicos que absorben estas moléculas, habitualmente, filtros de carbón activo con diferentes concentraciones de permanganato potásico.

De esta manera, estos filtros se colocan en la entrada de cualquier gas al laboratorio (climatización, entrada de gases al incubador). Pero tenemos que tener en cuenta que su poder de absorción tiene una vida limitada.

Presión positiva

Mientras que el aire que entra en el laboratorio de FIV es de una limpieza extrema, el aire de las estancias de alrededor es de menor calidad, por ello, la presión dentro del laboratorio es mayor. Así, cuando se abre una puerta el aire escapa del laboratorio FIV de manera que se impide la entrada de aire sucio. Como el aire es tan limpio suele haber sistemas de recirculación en el sistema.

Otros parámetros

Además de los citados anteriormente, también es importante tener en cuenta:

• Luz: existen embriones que son extremadamente sensibles a la luz (hámster o conejo), es por ello, que por precaución se suele trabajar a intensidad luminosas bajas. Hasta hace poco se pensaba que los laboratorios debían tener una luz ténue, creyendo que la luz intensa podía retrasar el desarrollo emrbionario. Esto se ha desmentido últimamente, ya que se ha visto que en los laboratorios, a no ser que haya una luz UV indiciendo sobre la placa, no importa la luz que haya. Lo que sí es importante es diseñar el laboratorio de forma que no indiza la luz directamente sobre el sitio donde se están desarrollando los gametos.
• Humedad relativa: para evitar el crecimiento de hongos en el ambiente se pone inferior al 50%, situación de confort. Resulta caro de mantener junto a las demás características en una sala blanca.
• Materiales: en el diseño se emplean materiales nobles en el suelo, paredes y techo como son el acero inoxidable, linóleo, cerámica, pintura epoxi... Minimizando las superficies horizontales.
• EPI: En estos laboratorios se debe acceder siempre con mascarilla y gorros quirúrgicos que deben cubrir todo el pelo, desde la frente hasta abajo, para que no se contaminen ni las muestras ni el ambiente. También es importante llevar batas de laboratorio.

Recursos humanos

La plantilla se encuentra constituida por embriólogos, técnicos de laboratorio y personal de administración. Siendo recomendable tener una persona por cada 150 ciclos FIV/ICSI.

Una posible administración del laboratorio puede repatirse entre:

• Director.
• Embriólogos: supervisor diario, de equipos y del criolaboratorio.
• Técnicos de laboratorio.
• Personal de administración.

Sistemas de cultivo embrionario

Los sistemas de cultivo de embriones deben asemejarse lo máximo posible a las condiciones fisiológicas de las Trompas de Falopio. De hecho, la adecuación del medio de cultivo es directamente proporcional a la calidad que tendrán los embriones a la hora de implantarlos.

Antiguamente, estos medios se asemejaban en composición a los usados para el cultivo de células somáticas, pero con el tiempo fueron ganando complejidad.

Actualmente, se usan medios de cultivo secuenciales. Cada uno de ellos cubrirá las necesidades básicas del embrión en cada fase del desarrollo.

Control de calidad

El mantenimiento de una organización resulta imprescindible para tener una calidad apreciable en el laboratorio y con ello aumentar la probabilidad de éxito en la implantación.

Así, tenemos que tener en cuenta unos protocolos normalizados de trabajo (PNT), una revisión de resultados (tasa de fecundación/degeneración, tasa de división embrionaria, tasa de formación de blastocito, tasa de supervivencia, tasa de gestación, tasa de implantación).

Al mismo tiempo, referente a los equipos se debe comprobar diariamente y realizar unos registros, verificar con aparatos calibrados con trazabilidad, hacer los ajustes necesarios y un mantenimiento preventivo. El material debe ser fungible, las instalaciones, a su vez, tienen que tener unas revisiones de mantenimiento y controles de calidad y presentar unas acreditaciones del laboratorio: ISO9001 (Gestión de calidad), ISO17025 (Requisitos técnicos), ISO15189 (Gestión de laboratorios clínicos).

Referencias

• R.Matorras, J. Hernández, D. Molero (2008). Tratado de Reproducción Humana para Enfermería. Editorial Médica Panamericana. ISBN 978-84-7903-293-7